提rna晾太干了怎么办
来源：志趣文 时间： 2024-06-16
或者用可以短期保存RNA的专门的溶液TE溶液。
用乙醇清洗。由于RNA在空气中暴露时间过长，导致其表面被氧化，从而变得不透明，此时，可以用百分之75的乙醇清洗RNA，以去除其表面的氧化物，使其恢复透明。
溶解不了不一定是因为蛋白质浓度太高，有可能是因为RNA干燥的时间过长导致的难以溶解。这时候可以60度水浴5分钟，再在冰上溶解1小时左右即可 如果通过分光光度计测量紫外吸光度发现确实是蛋白质浓度较高，可以多加些水混匀后用酚-氯仿沉淀蛋白质，上清再用异丙醇沉淀，75%乙醇洗涤，晾干后加水溶解 ...
最后的到RNA的上一步是酒精洗涤，提取的RNA当然不是完全干燥，提取后可以用小号枪头洗出较多的液体，剩下就在空气中自然干燥；但是太干就不容易溶解，因为太干的话RNA之间就结合的非常紧密。
在室温静置5到10分钟。rna是核糖核酸在室温静置5到10分钟即可使其透明。通过变性剂破碎细胞或者组织，然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA，再经过沉淀、洗涤、晾干、最后溶解。
rna干燥最长需10分钟。在室温或真空干燥5-10分钟，管中看不见明显的液体残留即可，加DEPC水溶解，所加DEPC的体积没有固定的标准，要根据沉淀量的多少而定，这一点靠经验，少则10ul，多则几百ul都是可以的。
你的情况可能有两种可能：1. 像二楼说的那样，在用酒精洗完沉淀后，干燥过程时间太长，导致RNA不好溶解。但这种情况可像你那样在水浴中加热溶解个10min，一般是会溶的。所以你的问题看起来更像是第二种情况：2. 剩下的不溶沉淀根本不是RNA，而是在提取过程中没有去干净的杂质或蛋白。这种东西是不...
9. 室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀，大约晾5-10分钟即可。不要真空离心干燥，过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5%SDS，用枪头吸打几次，55-60℃放置10分钟使RNA溶解。如RNA用于酶切反应，勿使用SDS溶液。RNA也可用100%的去离子甲酰胺溶解，-70℃保存。注意事项：...
净台中风干1-2分钟（注意不要晾得太干,否则RNA沉淀不易溶解）.溶解沉淀：加入适量的RNase-free ddH2O溶解RNA沉淀.2、硅基质吸附法 随着实验方法的改进,现已发展出一种采用吸附材料纯化核酸的 方法.目前较常见的有：硅基质吸附材料、阴离子交换树脂和磁 珠等.硅基质吸附材料因其具有可特异吸附核酸,...
7[\/w,h2d6U$k5、70%乙醇洗沉淀一次。真空干燥。%A5Y;{(w%]3a*y,Oe)P6、RNA溶解液溶解沉淀,得RNA,分装,于-70℃保存。植物RNA提取过程中难点的相应对策植物RNA提取过程中难点的相应对策)o5B7d\/Q3_酚类化合物的干扰及对策:a9D*Z3K?7W许多植物组织特别是植物的果实(如苹果、樱桃、李子、葡萄等)和树木...
13450088821： 提rna时吸附柱晾干需要开口吗 -
德育妮 ______ 找个干净的地方晾一下,不要晾太干.
13450088821： 我提完RNA之后发现蛋白含量很高,我怎么进一步去掉蛋白.已经用DEPC水溶解,但是溶不了.我要用来做反转录 - 作业帮
德育妮 ______[答案] 溶解不了不一定是因为蛋白质浓度太高,有可能是因为RNA干燥的时间过长导致的难以溶解.这时候可以60度水浴5分钟,再在冰上溶解1小时左右即可 如果通过分光光度计测量紫外吸光度发现确实是蛋白质浓度较高,可以多加些水混匀后用酚-氯仿沉...
13450088821： 提RNA组织保存 -
德育妮 ______ 组织块可以直接保存不用分开,-80度冰箱存RNA提取组织材料是没有关系的,我最多存过半年没有问题.你用PBS洗也没关系,但不要反复长时间洗涤.最后给你个建议,对于提取RNA的样品,你可以在取样后立刻研磨后放到trizol试剂里,这样可以常温存放几个月没问题.之后直接就拿着这个存放液按照trizol法直接操作下去.
13450088821： 很简单的一个问题,关于rna提取的...
德育妮 ______ 我只做过液氮研磨,不太清楚你们的细胞研磨器是啥...是匀浆器?按照他给的protocol的做法是先称10mg样品,放到1.5mL ep里,再加500mL LY,再匀浆,充分混合后取上清(他没说,但我觉得可以离心),然后上DNA柱.LY中要加入beta巯基乙醇,抑制RNase,否则RNA极易降解. 我们做液氮研磨则是先取样品,研磨,研磨成粉之后称取合适的质量,然后加裂解液,充分混合后离心取上清.你看你们那里的条件选择合适的做法吧.
13450088821： 想要保存RNA比较久,怎么办? -
德育妮 ______ 如果保存时间过久,在-80度也放不了太久.你可以将你的材料保存起来,到时候再提取RNA.天根有这些样品保存的东西卖,可以将你的样品用液氮研磨后,加到这些Buffer里面保存在-80度.具体你就要自己咨询了.
13450088821： 病毒RNA的提取方法主要有哪几种 -
德育妮 ______ 方法很多(我从小木虫粘贴了一份很全的流程),主流的有三种.一、提禽流感病毒的详细步骤,可参考(我提过N次做定量PCR都没问题):1.取200ul样品数+阴性对照+阳性对照个1.5ml灭菌eppendorf管2.加600ul异硫氰酸胍,然后...
13450088821： 用trizol提取rna时,为什么dna不会溶解在水相 -
德育妮 ______ 提取RNA时如何去除DNA的污染的方法: 注意实验室的标准化问题,注意污染的存在,同时严格按照说明书上的操作应该没有 问题.发现DNA污染,用DNAse I 消化1小时,37度 离心取上清的时候,一定要小心不要取到中间的膜和下面的液体...
13450088821： 提rna没看到rna沉淀咋回事 -
德育妮 ______ rna.提取称取鲜酵母 159或干酵母粉 2.5g,倒入 100ml三角瓶中,加 NaCl 2.5g,水25ml,搅拌均匀,置于沸水浴中提取lh. 2.分离将上述提取液用自来水冷却后,装入大离心管内,以4000r/min离心10min,使提取液与菌体残渣等分离. 3.沉淀RNA...
13450088821： 为什么我提取的RNA会凝固成胶冻状我使用TRIZOL提取动物组织RNA,洗涤干燥后加入RNase - free 水后,几分钟后整个液体就凝固成胶冻状,这是为什么?... - 作业帮
德育妮 ______[答案] 能成凝胶状态的,一种可能是RNA浓度实在是太高了,稀释稀释就能解决问题. 还有一种可能是,你提的不是RNA,而是蛋白.而且是高浓度蛋白
13450088821： 要提RNA 器材怎么处理
德育妮 ______ 玻璃器皿、金属器具可用锡箔纸封口包好,烘箱高温处理,我们好像是180度烘烤16小时.温度高一些,时间也可以短一些. 塑料制品,如tips等等,可用DEPC水处理.用一些锥形瓶,把tips浸泡在DEPC水里,摇床过夜,转速使液体可盖过tips就可以了,你要是东西装的少,速度不必太快,也不能太快,以免溢出,污染摇床,切记.完后高温高压灭菌,将tips装入用氯仿擦净,或是无水酒精擦净的盒子,把tips的水分烘干,就可以使用啦
