酶底物法 水中微生物检测,酶底物法好还是滤膜法好

www.zhiqu.org     时间: 2024-06-13

大肠埃希氏菌酶底物法 (enzyme substrate technique for escher) 是指在选择性培养基上能产生 β-半乳糖苷酶 (β-D-galactosidase) 分解色原底物释放出色原体培养基呈现颜色变化,并能产生 β-葡萄糖醛酸酶 (β-glucuronidase) 分解荧光底物释放出荧光产物,使菌落能够在紫外光下产生特征性荧光,以此技术来检测大肠埃希氏菌的方法为大肠埃希氏菌酶底物法。

本法可在 24h 判断水样中是否含有的大肠埃希氏菌的最可能数 (MPN) 值。可同时检测总大肠菌群,方法见 82.6.3。

仪器和装置

紫外光灯 6W、波长 366nm 的紫外灯,用于观测荧光反应。

其他仪器同 82.6.3。

培养基与试剂

培养基与试剂同 82.6.3。

检验步骤

检验步骤同 82.6.3。

结果观察与报告

1) 结果判读。结果判读同 82.6.1,对照表82.5 与表82.6。水样变黄色同时有蓝色荧光判断为大肠埃希氏菌阳性,水样未变成黄色而有荧光产生不判定为大肠埃希氏菌阳性。

2) 定性反应。将经过 24h 培养颜色变成黄色的水样在暗处用波长为 366nm 的紫外光灯照射,如果有蓝色荧光产生判断为阳性反应,表示水中含有大肠埃希氏菌。水样未产生蓝色荧光判断为阴性反应。结果以大肠埃希氏菌检出或未检出报告。

a.10 管法。将培养 24h 颜色变成黄色的水样的试管在暗处用波长为 366nm 的紫外光灯照射,如果有蓝色荧光产生则表示有大肠埃希氏菌存在。

计算有荧光反应的试管数,对照表82.4 查出其代表的大肠希氏菌最可能数。结果以MPN /100mL 表示。如所有管未产生荧光,则可报告为大肠埃希氏菌未检出。

b.51 孔定量盘法。将培养 24h 颜色变成黄色的水样的定量盘在暗处用波长为 366nm的紫外光灯照射,如果有蓝色的荧光产生则表示该定量盘穴中含有大肠埃希氏菌。

计算有荧光反应的孔穴数,对照表82.5 查出其代表的大肠埃希氏菌最可能数。结果以 MPN/100mL 表示。如所有孔未产生荧光,则可报告为大肠埃希氏菌未检出。



酶底物法测定水质粪大肠菌群是国标方法吗~


酶底物法测定水质粪大肠菌群是还不是我国现行的国标方法.
但酶底物法科立得TM(Colilert) 试剂检测中粪大肠菌群 是ISO 9308-2:2012和美国EPA标准,
我单位是社会检测机构,这两个标准也是可以使用的.

酶底物法要好很多。ISO国际标准上规定,滤膜法仅适用于干净水体,酶底物法适用于所有水体。而且由于方法本身限制,滤膜法结果一般偏低


#慎叔农# 【求助】如何根据酶活来确定酶的添加量 -
(15252449813): 酶活测定方法 还原法 酶与底物在特定的条件下反应,酶可以促使底物释放出还原性的基团.在此反应体系中添加化学试剂 ,酶促反应的产物可与该化学试剂发生反应,生成有色物质.通过在特定的波长下 比色 ,即可求 出还原产物的含量 ,从...

#慎叔农# 什么叫 酶免疫测定 -
(15252449813): 酶免法是酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA),它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测.用酶与指示剂的反应来放大信号便于检测. 就是用酶标记抗原或抗体,抗原抗体反应后加入酶的指示剂(酶的底物反应后会显色),颜色的深浅与抗原或抗体的量成正比.

#慎叔农# 什么是酶标法 -
(15252449813): 用连接有酶的化学物质与待检物质结合,加入能被酶分解的底物,通过底物的量的变化间接反映待检物质的量,即为酶标法.

#慎叔农# ELISA中,酶对底物的催化作用是什么东西啊?酶的底物是什么? - 作业帮
(15252449813):[答案] 复合体中第一个酶催化的产物,直接由邻近下一个酶催化,第二个酶催化的底物对其变构酶的作用都表现正协同效应,但有时如3-磷酸甘油醛脱氢酶对NAD

#慎叔农# 酶分为六大类,从糖代谢中各举一例,包括产物底物和酶 -
(15252449813): 酶的分类? 国际酶学委员会(I.E.C)规定,按酶促反应的性质,可把酶分成六大类:? 1.氧化还原酶类(oxidoreductases)指催化底物进行氧化还原反应的酶类.例如,乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶、过氧化氢酶等.? 2.转移酶...